Електрофорез що це таке, для чого це робиться і як це робиться
Електрофорез - це лабораторна методика, яка виконується з метою поділу молекул відповідно до їх розміру та електричного заряду, щоб діагностувати захворювання, можна перевірити експресію білка або виявити мікроорганізми.
Електрофорез - це проста і недорога процедура, яка використовується в лабораторних процедурах і в дослідницьких проектах. Відповідно до призначення електрофорезу, для досягнення діагнозу може знадобитися проведення інших тестів та обстежень, наприклад.
Для чого це
Електрофорез може бути виконаний для різних цілей, як в дослідницьких проектах, так і в діагностиці, оскільки це проста і недорога методика. Таким чином, електрофорез може бути проведений для:
- Визначте віруси, грибки, бактерії та паразити, причому ця програма є більш поширеною в дослідницьких проектах;
- Тест на батьківство;
- Перевірте експресію білків;
- Визначте мутації, корисні, наприклад, для діагностики лейкозу;
- Проаналізуйте типи циркулюючого гемоглобіну, корисні при діагностиці серповидноклітинної анемії;
- Оцініть кількість білків, присутніх у крові.
Відповідно до призначення електрофорезу, для завершення діагностики для лікаря може знадобитися проведення інших додаткових тестів.
Як це робиться
Для проведення електрофорезу необхідний гель, який може бути з поліакриламіду або агарози залежно від об'єктиву, буфера для електрофорезу та вани, маркера молекулярної маси та флуоресцентного барвника, окрім ультрафіолетового світлодіодного обладнання, також відомого як транслюмінатор.
Після приготування гелю потрібно поставити конкретний предмет так, щоб лунки були зроблені в гелі, в народі його називали гребінцем, і нехай гель встановлюється. Коли гель буде готовий, просто нанесіть речовини на лунки. Для цього маркер молекулярної маси повинен бути поміщений в одну з лунок, позитивний контроль - це речовина, про яку відомо, що це таке, негативний контроль, що гарантує обгрунтованість реакції, і проби, що підлягають аналізу. Всі зразки повинні бути змішані з флуоресцентним барвником, оскільки таким чином можна візуалізувати смуги на трансілюмінаторі.
Гель із зразками повинен бути поміщений у чану для електрофорезу, яка містить специфічний буферний розчин, а потім пристрій включається так, щоб було електричний струм і, отже, різниця потенціалів, що важливо для поділу частинки відповідно до їх навантаження та розміру. Електрофоретичний час роботи змінюється залежно від мети процедури і може тривати до 1 години.
Після закінчення визначеного часу можна переглянути результат електрофоретичного пробігу через трансілюмінатор. Коли гель поміщається під ультрафіолетове або світлодіодне світло, можна візуалізувати схему обв'язки: чим більша молекула, тим менша її міграція, чим ближче до лунки, а чим світліша молекула, тим більший міграційний потенціал.
Щоб реакція була перевірена, смуги позитивного контролю повинні бути візуалізовані і нічого не повинно бути візуалізовано в негативному контролі, інакше це вказівка на те, що відбулося забруднення, і весь процес потрібно повторити.
Види електрофорезу
Електрофорез може бути виконаний для різних цілей, і, відповідно до його мети, можна використовувати кілька видів гелю, найпоширенішими є поліакриламід та агароза..
Електрофорез для виявлення мікроорганізмів частіше проводиться в науково-дослідних лабораторіях, однак для діагностичних цілей електрофорез може бути використаний для ідентифікації гематологічних захворювань та захворювань, що розвиваються зі збільшенням кількості білків, будучи основними видами електрофорезу :
1. Електрофорез гемоглобіну
Електрофорез гемоглобіну - це лабораторна методика, яка виконується для виявлення різних типів циркулюючого в крові гемоглобіну, що дозволяє виявити наявність захворювань, пов’язаних із синтезом гемоглобіну. Тип гемоглобіну визначають за допомогою електрофорезу при конкретному рН, в ідеалі між 8,0 і 9,0, при цьому перевіряється модель смуг, яка може бути порівняна зі звичайною схемою, що дозволяє ідентифікувати наявність аномальних гемоглобінів.
Для чого він зроблений: Електрофорез гемоглобіну проводиться для дослідження та діагностики захворювань, пов’язаних із синтезом гемоглобіну, таких як серповидноклітинна анемія та гемоглобін С, крім корисного для диференціювання таласемії. Дізнайтеся, як інтерпретувати електрофорез гемоглобіну.
2. Білковий електрофорез
Білковий електрофорез - це іспит, який вимагає лікар для оцінки кількості білків, що циркулюють у крові, і, таким чином, для виявлення захворювань. Цей тест робиться з зразка крові, який центрифугують для отримання плазми, частини крові, що складається, серед інших речовин, з білків.
Після електрофорезу можна візуалізувати схему смуг і, згодом, графік, в якому вказано кількість кожної фракції білків, що є основним для діагностики.
Для чого він зроблений: Білковий електрофорез дозволяє лікарю досліджувати виникнення множинної мієломи, дегідратації, цирозу, запалення, хвороб печінки, панкреатиту, вовчака та гіпертонії за смуговою схемою та графіком, представленим у звіті обстеження.
Зрозумійте, як це робиться, і як зрозуміти результат білкового електрофорезу.
