Молекулярна діагностика, що це таке, для чого це і як це робиться
Молекулярна діагностика відповідає набору молекулярних методик, які мають на меті виявити зміни в ДНК, які можуть свідчити, наприклад, про генетичні захворювання або рак. Крім того, молекулярні методи широко застосовуються для ідентифікації та підтвердження інфекційних захворювань, оскільки вони представляють більш швидкий і точний метод діагностики.
Молекулярна діагностика дорога і, отже, не дуже часто її запитують лікарі, проте вона дає точні результати щодо наявності змін, способу, який може перешкоджати функціонуванню організму та реакції пацієнта на лікування.
Для чого це
Молекулярна діагностика може бути проведена з декількома цілями, основними з яких є:
- Ідентифікація мутацій, пов'язаних із лейкемія, наприклад, ідентифікація транслокації BCR-ABL, яка характерна для хронічного мієлоїдного лейкозу (ХМЛ);
- Характерні мутації гематологічні захворювання, наприклад, спадковий гемохроматоз, поліцитемія, есенціальна тромбоцитемія та тромбофілія, наприклад.
- Молекулярні зміни, які вказують на виникнення рак, наприклад, колоректальний, легеневий, рак молочної та головного мозку, наприклад;
- Діагностика інфекційні захворювання, такі як гепатит, уретрит, токсоплазмоз, лейшманіоз тощо Вірус ВПЛ.
Молекулярна діагностика, незважаючи на те, що вона вважається дорогою порівняно з іншими методами діагностики, є більш точною, оскільки вона здатна інформувати про зміни, пов'язані з певним захворюванням, та про ступінь впливу цієї зміни в організмі, тим самим допомагаючи лікуванню людини..
Окрім того, що використовується для діагностики декількох захворювань, молекулярні методики також використовуються для оцінки реакції на лікування, особливо у людей, хворих на рак, як один з найбільш ефективних методів вказування на прогресування захворювання та рецидив..
Як це робиться
Молекулярна діагностика може бути проведена з будь-яким зразком, за запитом лікаря, який може найкраще надати інформацію про стан пацієнта, яка може бути сечею, слиною або, в більшості випадків, кров’ю. Пост або будь-яка інша підготовка для іспиту не потрібна.
Зразок збирають та направляють у лабораторію разом із вказівками лікаря, що інформують про іспит чи тип дослідження, який слід провести. Молекулярна методика, що виконується, залежить від запиту, який вимагається, і включає низку точних процедур, спрямованих на виявлення наявності чи відсутності змін, про які вимагає лікар.
Зазвичай використовується лише невелика кількість відправленого зразка, решта зберігається так, що, якщо необхідно, іспит повторюється.
Подивіться, які основні молекулярні методи
ПЛР
А ПЛР, короткий для ланцюгової реакції полімерази або Полімеразна ланцюгова реакція, це молекулярна методика, яка полягає в ампліфікації фрагмента генетичного матеріалу, ДНК чи РНК, з метою ідентифікації мутацій і, таким чином, допомоги в діагностиці захворювань.
Ця методика виготовляється з вилучення та очищення генетичного матеріалу, який потім поміщають у суміш, в якій один із компонентів є рестрикційним ферментом, який змінюється залежно від запитуваної експертизи та функцією якого є розрізання матеріалу на фрагменти так що можна виявити можливі генетичні зміни. Суміш поміщають у термоциклер, який представляє собою пристрій, який діє через перепад температури, вказаний фахівцем згідно з іспитом, і, таким чином, дозволяє посилити генетичний фрагмент. У разі звичайної ПЛР після ампліфікації продукт ПЛР піддають електрофорез, що є молекулярною технікою на основі ваги та розміру фрагментів, тобто за цими характеристиками формується смугова картина, аналіз якої проводиться на основі позитивної контрольної смуги, тобто смуги, яка відома що відповідає генетичній зміні.
А ПЛР у режимі реального часу, також називається qPCR, це тип кількісної ПЛР, тобто, крім ідентифікації генетичної зміни, він здатний надати інформацію про експресію генів, тобто про те, наскільки змінений ген експресується в організмі, таким чином, він може бути використовується для сприяння діагностиці та моніторингу лікування. ПЛР у режимі реального часу не потребує електрофорезу, весь процес ампліфікації та аналізу генетичного матеріалу здійснюється пристроєм, а результат інтерпретується кваліфікованим медичним працівником.
Послідовність
The послідовності це молекулярна методика, яка складається з визначення послідовності нуклеотидів ДНК, які є формуючими одиницями генетичного матеріалу. Послідовність послідовностей відбувається за реакцією, подібною до ПЛР, однак у ампліфікаційну суміш модифіковані нуклеотиди додаються додаванням фторхромів, які в міру ампліфікації матеріалу модифіковані нуклеотиди включаються в ДНК і утворюють кілька фрагментів, які відповідають твору послідовності.
Продукт реакції поміщають у пристрій, зване секвенсором ДНК, в якому, коли фрагменти досягаються лазером обладнання, фторхроми збуджуються, випромінюючи флуоресценцію, що вказується обладнанням за допомогою піків, при цьому кожен пік відповідає до нуклеотиду. Після закінчення реакції обладнання інформує послідовність ДНК, таким чином, зможе допомогти лікареві в діагностиці генетичних захворювань..
